2024年07月29日，四川农业大学动物医学院徐志文＆朱玲（通讯作者）团队在frontiers in microbiology上发表题为“rescue and characterization of pcv4 infectious clones:pathogenesis and immune response inpiglets.”的最新研究论文。研究证实了 pcv4 在亚临床感染中的作用，这种感染的特点是轻微的多系统炎症和免疫器官淋巴细胞耗竭。
猪圆环病毒（porcine circovirus, pcv）是一类对全球养猪业造成重大经济损失的病原体。自2019年猪圆环病毒4型（pcv4）首次在中国被发现以来，其生物学特性和致病机制尚不清楚，且该病毒尚未能从临床样本中分离出来。这限制了我们对pcv4致病性的评估、有效预防和控制策略的制定以及疫苗的研发。本研究成功从感染性克隆中拯救出pcv4，并利用该病毒株对4周龄的无特定病原体（spf）小猪进行了鼻内接种实验，以评估pcv4的致病性。
本研究成功构建了猪圆环病毒4型（pcv4）的感染性克隆，并从小鼠体内拯救出病毒。通过在pk-15细胞中转染和连续传代，检测到pcv4病毒载量的增加，并在细胞质中观察到pcv4 cap蛋白的表达，证实了病毒在细胞内的复制能力。此外，通过免疫荧光分析（ifa）和wb技术，进一步验证了pcv4的成功拯救和蛋白表达。
利用拯救出的pcv4病毒，对4周龄的无特定病原体（spf）小猪进行了鼻内接种实验，以评估其致病性。实验结果显示，接种后的小猪出现了食欲减退、腹泻等临床症状，同时伴随着体重增长的减缓。通过qpcr技术，在小猪的血清和多个器官中检测到了pcv4病毒的存在，特别是在肺和淋巴结中的病毒载量最高，这表明pcv4具有明显的组织趋向性。
组织病理学检查揭示了pcv4感染小猪的多个器官出现了病变，包括肝脏的空泡变性、脾脏的淋巴细胞减少、肺组织的结构损伤以及肾脏和淋巴结的退行性变化。免疫组化（ihc）分析进一步证实了pcv4抗原在这些器官中的分布。此外，血清中促炎细胞因子水平的显著升高，如il-1β、il-6和tnf-α，表明pcv4感染能够诱导小猪体内的炎症反应。这些发现为理解pcv4的致病机制和相关疾病的炎症反应提供了新的视角，并为未来的预防和控制策略的开发奠定了基础。
兽医研圈报道链接：
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论文链接：
doi: 10.3389/fmicb.2024.1443119